كلية التقانات الأحيائية

 ناقشت كلية التقانات الاحيائية رسالة الماجستير الموسومة تقييم استخدام الجسيمات النانوية للفضة المصنعة حيويا بواسطة بكتريا Lactobacillus. Spp  ضد العزلات البكتيرية ذات المقاومة المتعددة للباحث فريد كاظم حمزة / كلية التقانات الاحيائية وقد بين الباحث  ان طريقة التصنيع الحيوي للجسيمات النانوية  اكتسبت مجالًا مهمًا للغاية نظرًا لفوائدها الاقتصادية والصديقة للبيئة  والتي فاقت تكوينها الطرق الكيميائية والفيزيائية. تهدف هذه الدراسة إلى التخليق الحيوي لـ AgNPs.  بواسطة عزلات. Lactobacillus spp. تم الحصول عليها من منتجات الألبان التي تم تخزينها في مختبر الأحياء الدقيقة المتقدم /كليه علوم – قسم علوم الحياة - جامعة بابل. للتعرف على (L. plantarum، L.acidophilus، L. fermentum) تمت زراعة هذه العزلات على وسط De man Rogosa (MRS) السائل و الاكار  لمدة 24 ساعة عند 37 درجة مئوية.. ومن اختبار التخمير للكربوهيدرات Lactobacillus spp. اثبت أن إحدى هذه العزلات أكثر كفاءة في إنتاج AgNPs ؛ تم تشخيص هذه العزلة باستخدام نظام Vitek2 مثل L. plantarum. الخصائص المظهرية وتركيبية  لجزيئات الفضة النانوية ، بالاعتماد على الاختبارات  الكيموحيوية ، وتشير النتائج إلى أن العزلات الثلاثة كانت اختيارية لاهوائية ، ، عصويه الشكل  موجب الكرام ، غير متحركة و يمكن أن تعيش في كل من الظروف الهوائية واللاهوائية ويتم تشخيصها عن طريق الاختبارات الكيميائية الحيوية ، وقد تم تحديد العزلات على أنها Lactobacillus. . تم استخدام L. plantarum كمصدر لـ Ag NPs وتم تصنيعه حيوياً عن طريق إضافة نترات الفضة AgNO3 إلى بروث خالية من الخلايا لكل L. plantarum بتركيز (5 ملي مولاري) من AgNO3 لاستخدام انزيمات الاكسدة والاختزال  لتخليق Ag NPs. تمت الإشارة إلى التصنيع الحيوي لـ AgNPs أولاً عن طريق تغيير اللون من الأصفر إلى البني المحمر لـ Ag NPs. تم تحديد خصائص الجسيمات النانوية التخليقية الحيوية بواسطة القياس الطيفي المرئي للأشعة فوق البنفسجية والذي من خلاله لوحظ أقصى امتصاص للجسيمات النانوية وكان (429 نانومتر). (SEM) لاكتشاف حجم وشكل وتوزيع الجسيمات النانوية ؛ كان الشكل كرويًا ومتجانسًا وتراوح الحجم بين (30-100 نانومتر) ، تم تحليل حدوث Ag عن طريق التحليل الطيفي للأشعة السينية المشتتة للطاقة (EDS). 

أظهرت Ag NPs المُصنَّع بيولوجيًا نشاطًا مضادًا للجراثيم ضد البكتيريا المقاومة للأدوية المتعددة MDR لكل من البكتيريا موجبة الكرام وسالبة الكرام  Staph. epidermidis  و E. coli. و K pneumoniae ، و Staph. aureus ، بتركيز مختلف (100،200،300،400 و 500 مايكرووغرام / مل). NPs بعد الحضانة لمدة 24 ساعة عند 37 درجة مئوية ، بعد الحضانة تم قياس مناطق التثبيط بالملليمتر لكل تركيز من Ag NPs ، وأظهرت النتائج أن Ag NPs لديها القدرة على تثبيط نمو البكتيريا وظهر نشاطها المضاد للبكتيريا ضد موجبه لكرام و بكتريا سالبة لكرام  كانت منطقة التثبيط أكبر في البكتيريا سالبة الجرام عنها في البكتيريا موجبة الكرام. وكانت أكبر منطقة تثبيط ( AgNPs (26 ملم) في K pneumoniae بتركيز (500 ميكروغرام / مل) بينما كانت أكبر منطقة تثبيط في S. aureus هي ( 20 ملم ) مع التركيز نفسه .  

  الكشف عن تكوين الغشاء الحيوي  في العديد من البكتريا التي تصنع متعدد السكريات الخارجيه. تشكيل الغشاء الحيوي  بواسطة K. Pneumoniae و E. coli. تم اختباره من خلال زرعت البكتريا على وسط  BHIC مع أو بدون AgNPs. عندما نمت المستعمرات بدون AgNPs في الوسط ، ظهرت البكتريا  على شكل مستعمرات سوداء بلورية جافة ، مما يشير إلى إنتاج السكريات الخارجية ، وهو شرط أساسي لتكوين الأغشية الحيوية ، بينما عندما نمت الكائنات الحية على BHIC مع AgNPs   500ميكروغرام / مل) ، لم تنمو البكتريا  . أثناء المعاملة  بتراكيز منخفضة من 100 AgNPs  مايكروغرام / مل) ، استمرت البكتريا  في النمو ، لكن عند اضافة AgNPs أعاق تخليق متعدد السكريات الخارجيه ، مما يدل على عدم وجود مستعمرات بلورية سوداء جافة. وجد أنه عند التركيز العالي من AgNPs يثبط نمو البكتيريا بأكثر من 98?. عندما يتم إيقاف تركيب عديدات السكريات الخارجية ، لا يمكن للبكتريا  تكوين غشاء حيوي.

جمعت 50 عزلة من K. Pneumoniae من عينات سريرية مختلفة بما في ذلك (البراز والبول والدم والجروح والبلغم ومسحات الأذن) من مدينة مرجان الطبية ومستشفى الحلة التعليمي ومختبر الصحة العامة. بلغ عدد العزلات البكتيرية التي تم الحصول عليها حسب موقع الإصابة 15 عزلة من التهابات الجروح ، 20 عزلة من التهابات المسالك البولية ، 6 عزلات من البلغم ، 3 عزلات من الدم ، 5 عزلات من مسحة الأذن وأخيراً عزلة واحدة من عينات البراز ، ومن كلا الجنسين.وتم التعرف على العزلات K. pneumoniae بواسطة جهاز  Vitek -2 فيما يتعلق باختبار الحساسية للمضادات الحيوية ، أظهرت الدراسة الحالية أن جميع العزلات (100?) كانت مقاومة لـ Ceftazidime و Ceefpime ، بينما أقل minocycline 26،67?. أظهرت الدراسة الحالية حدوث بعض عوامل الضراوة مثل الكبسولة في جميع العزلات (100?) ، تم تسجيل تكوين الأغشية الحيوية في 30 عزلة من K. Pneumoniae ، وتم الكشف الجزيئي لبعض جينات الغشاء الحيوي  (wbbm ، mrkD ، wzm) بالطريقة التقليدية. تقنية PCR. وجد أن ارتفاع نسبة حدوثه.تلخصت الدراسة إلى أن قدرة L. plantarum على التخليق الحيوي لـ Ag NPs تم تقديمها كمضاد للبكتيريا ومضاد للبيوفيلم ضد العزلات البكتيرية المقاومة للأدوية المتعددة.